فناوریCRM به عنوان منبع توانایی راهبُردیمی‌باشد زیرا که به آن اجازه توسعه، مدیریت و تجزیه و تحلیل اطلاعات مشتریان جهت تقسیم‌بندی، سودآوری، ارتباطات حمایتی، وظایف متقاطع و تعامل با مشتریان را به شرکت می‌دهد (Gordon, 2002).
Sawhney and Zabin ، در سیستم نگرشی خود به ارتباطات، فناوری را در مرکز ساختار و فرایندهای ارتباطی قرار می‌دهند. برای به‌کارگیری فرایند مدیریت رابطه‌ای مورد قبول، شرکت‌ها نیاز دارند که توانایی‌های فناوری را بکار گیرند که از جمله می‌توان به موارد ذیل اشاره نمود.

پایگاه داده
CRM تحلیلی
یکپارچگی سیستم ها
نقش قسمت IT
۳) مسائل فرایندی
امروزه شرکت‌ها به طور فزاینده‌ای در جستجوی پیش بردن عملکرد خود وسیله حداکثر کردن ارزش ارتباط مشتری می‌باشند. در کنار فناوری، اگرچه بسیاری از شرکت‌ها در توسعه اهمیت آن شکست می‌خورند، تعریف مناسب و یکپارچه‌ای از فرایندها بر مشتری متمرکز می‌شود (Siebel, 2002 p.1). شرکت‌ها مرکز تلفن و نرم‌افزار اتوماسیون نیروی فروش بکار می‌گرفته‌اند اما بسیاری از آن‌ها به آسانی فناوری جدید را به فرایندهای موجود اضافه می‌کنند. این موضوع باعث شکست شرکت در دستیابی به اهداف خود می‌شود. برای شرکت‌های موفق ،"CRM یک سری از فرایندها و راهبردها است که ارزش جدید و دو طرفه برای هر یک از مشتریان ایجاد کرده، ترجیحاتی برای سازمان می‌سازد و نتایج سازمان را در طول حیات ارتباطش با مشتریان بهبود می‌دهد."(Gordon, 2002). در سطح تکنیکی، یکپارچگی زیاد فرایند کسب‌وکار به عنوان یک چالش حیاتی سازمان‌ها در به‌کارگیریCRMهست. زیرا باید به این نکته توجه کرد که هدف CRM بهبود فرایندهای بازاریابی فروش و خدمات شرکت برای ارتقاء سودآوری ارتباط با مشتری هست (Kotorov, 2003).
۴) مسائل افراد
فرایندها و فناوری‌ها که به‌کارگیریراهبردها و دستیابی به اهداف CRM را یاریمی‌رسانند، تنها زمانی اثربخش خواهد بود که افراد آن‌ها را انجام دهند. همیاری میان افراد کلید موفقیت مدیریت ارتباط با مشتری هست. یکی از بزرگ‌ترینچالش‌ها در به‌کارگیری مدیریت ارتباط با مشتری، تنظیم کردن افراد با راهبُرد و فرایندهای مشتری هست (Disckson et al, 2005).
به‌کارگیری موفق CRM تنها با تغییر سازمان اتفاق می‌افتد و"… تغییر زمانی رخ می‌دهد که افراد دقیقاًَ بدانند که تغییر چه چیزی از آن‌هامی‌خواهد، و چرا ضروری است و چگونه آن‌هامی‌توانند برای تغییر تلاش کنند و آن را شکل دهند، تقویت و جبران کنند که این وسیله تمام سیستم‌های درونی که برای رفتار آن‌ها طراحی شده است رخ می‌دهد. اگر تمام این موارد در یک مسیر صحیح قرار گیرد، آرزوی تغییر دست‌یافتنیمی‌شود” (McGovern and Panaro, 2004, p33)
تمرکز بر مشتری، اهداف و رهبری
فرایندهای منابع انسانی
مکانیزم وظایف متقاطع
تجزیه و تحلیل سؤالات تحقیق((Chakravorti, 2006, P36
در جهت دستیابی به عوامل کلیدی موفقیت CRM، مباحث مربوط به CRM بیان شد که نشان می‌دهدبه‌کارگیریCRM تنها زمانی موفق خواهد بود که این چهار مسئله را نیز مدنظر قرار دهد.
همچنین Paul Gray & Jongbok Byunدر تحقیق خود در دانشگاه کالیفرنیا با عنوان"مدیریت ارتباط با مشتری"مباحث CRM را استقلال مشتری و نابالغی تکنیکیمی‌دانند. آن‌ها بیان می‌کنند که استقلال مشتری بسیار مهم است زیرا CRMبا حجم انبوهی از داده‌ها در مورد مشتریان از کانال‌های مختلف مواجه می‌باشد و فرایند خصوصی‌سازی (توجه به داده‌های هر مشتری به صورت انفرادی) در CRM به شناسایی فردی هر مشتری و جمع‌آوریداده‌های رفتاری و سرگذشت فردی هر مشتری نیازمند هست. همچنین در نابالغی فناوری بیان می‌شود که بیشتر فناوری‌ها نابالغ هستند و هزینه‌ها و زمان به‌کارگیری عادیآن قدر طولانی است که توان بالقوه استفاده‌ کنندگان را از بین می‌برد ( Gray, Byun, 2001, P 28).
Christopher Bull در مقاله خود با عنوان “مسائل راهبُردی در به‌کارگیریCRM” که در مجله مدیریت فرایند کسب‌وکار به چاپ رسیده است مسائل CRM را بدین شرح بیان می‌کند:
کمبود دانش پیرامون مفهوم CRM
استفاده از CRM به طور اثربخش برای مشتریان هدف و نیاز به یکپارچگی سیستم ها
فرایندهایکسب‌وکار تغییر برای هماهنگی با سیستم CRM
اثربخش نبودن ابزارهای نرم‌افزاری. ( Bull, 2003)
با توجه به نقطه نظرات گوناگون می‌توان انواعی از CRMرا بیان کرد ولی انواع CRM که در ادامه بیان می‌شودمتداول‌تریننمونههست.
تنوع و گاهی اوقات اشتراک مفاهیم CRM از سه بعد مدیریت ارتباط با مشترینشأتمی‌گیرد که عبارت‌اند از: CRM تحلیلی ، CRM عملیاتی و CRM مشارکتی.
CRMتحلیلی بر ابزارهای تحلیلی پیچیده برای تعامل داده در انبار داده‌ها برای روشن ساختن روندهای آینده و الگوی خرید مشتریان هست.
CRMعملیاتی، فرایندهای کسب و کاری که مدیریت ارتباط با مشتریان را بهینه می‌کند اشاره دارد.
CRM مشارکتی، در مورد یکپارچگی و مشارکت منابع داخلی سازمان و میان سازمان و شرکا و مشتریان می
باشد. (Reynolds, 2002, P3)
۲-۱۷-به‌کارگیریCRM
در این بخش با توجه به مطالب بیان‌شده در قسمت‌های قبلی مواردی جهت به‌کارگیریCRM بیان می‌شود. و از آنجا که هدف در این تحقیق بحث در مورد به‌کارگیریCRMنمی‌باشد مباحث کلی مطرح می‌گردد. به‌کارگیریCRM خود مبحث گسترده ایست که می‌تواند به طور جداگانه موضوع تحقیق قرار گیرد.
درک نیازهای مشتری و ارائه خدمات ارزش افزوده به عنوان عواملی که شکست و پیروزیشرکت‌ها را رقم می‌زنند درک می‌شود. Kotler اشاره می‌کند که CRM در حول بازاریابی و آغاز یک تجزیه و تحلیل عمیق از رفتار مشتری می‌چرخد. Chaffey مدلی برای مدیریت مشتریان ارائه می‌دهد؛ مدل او بیان می‌کند که مشتریان در درجه اول از طریق روابط شفاف و از یک موقعیت باارزش مثبت به وجودمی‌آیند و سپس آن‌هاوسیله خدمات مناسب حفظ می‌شوند و ارتباط از طریق ارائه خدمات و محصولات مناسب که به طور مشخص برای هر گروه از مشتریان باشد ادامه پیدا می‌کند. این نگرش بدین معنی است که CRM از فناوری اطلاعات و ارتباطات به جمع‌آوریداده‌هامی‌پردازد که می‌تواند پس از آن برای تجزیه و تحلیل اطلاعات تهیه‌شده مورد نیاز برای ایجاد یک تعامل فردی موثرتر با مشتری استفاده کند.
از دیدگاه عملیاتی ،Bose اشاره می‌کند که CRMیک انسجام از فناوری‌ها و فرایندهایکسب‌وکارمی‌باشد که هدفش تأمین نیاز یک مشتری در طول تعامل با او است. ضمن اینکه منافع بالقوه CRM جذاب هستند، به‌کارگیریCRM باید به دقت مدیریت شود تا به نتیجه برسد. به منظور جا انداختن موفق CRM، استفاده‌ کنندگان از سیستم باید درگیر شوند و انتظارات مدیریت مورد توجه قرار گیرد. در این راستا فرایندهایکسب‌وکار باید مانند فناوری تغییر کنند. که به همراه مدیریت دانش و مدیریت تعاملات به عنوان دو فرایند کلیدی توسط Zablah,Bellenger,and Johnstonشناخته‌شده‌اند. فرایند اصلی استفاده از هوش بازاریابی، برای ایجاد و نگهدارییک پرتفو از روابط با مشتریان سودمند می‌باشد که فرایندهای بعدیرا تغذیه می‌کند. به‌کارگیریCRM اغلب با مشکل همراه است و موارد زیادی از شکست پروژه‌هایCRM را می‌توانیافت. “مشتریان شکایت دارند که بیشتر از۵۰% از پروژه‌هایCRM شکست می‌خورند و اغلب هزینه‌ها را بین ۴۰% تا ۷۵% دست کم گرفته‌اند.” (Everett,2002,p25).
به‌کارگیریCRM در محیط کسب‌وکار امروزیغیرقابل بحث است. خواه مشتریان درونییا بیرونی، مصرف‌کنندهیا شرکت‌ها باشند و یا خواه با آن‌ها به صورت الکترونیکییا رو در رو در ارتباط باشیم و یا اینکه داخلی و یا بین‌المللی باشند، CRM بلیت شما برای موفقیت است.
به عنوان دستاورد CRM برای بسیاری از قسمت‌هایکسب‌وکار، رویکرد کل نگر برایسازمان‌ها پیشنهاد می‌شود. رویکرد کل نگر CRM را به همراه فرایندهایکسب‌وکار مشتری محور و همچنین یکپارچگیسیستم‌هایCRM در قلب سازمان جایمی‌دهد. رویکرد کل نگر ارتباط مشتریان و یا کانال‌های ارتباطی مختلف را به طور موثر و همکاری محور حفظ می‌کند. اگرچه مشکلات تعارض کانال‌ها به علت وجود تجارب مختلف مشتریان و بر اساس کانال‌های فروش شناساییمی‌شود (Peppard, 2000).
مبحث کاربردی دیگر منبع یابی است. شرکت‌ها برای واگذاری کمبودهای خود در زمینه CRM دارایجایگزین‌های کمیمی‌باشند. بر اساس Newell(2000)، مدیریت ارتباط با مشتری وسیله مفیدی برای شناسایی مشتریان حقیقی و کمک مناسبی برای کنار گذاشتن مشتریان بدرد نخور هست. همچنین Clemin بیان می‌کند که تفاوت میان مشتریان سودآور و متوسط زیاد می‌باشد. این ایده بیان می‌کند که شما نمی‌توانید رابطه سودآوری با تمام مشتریان داشته باشید و عملاً هدف‌گذاری مشتریان با خدمات یا کالاهای گوناگون در خدمات مالی مانند بانک‌ها، بیمه‌ها و کارت‌های اعتباری بسیار گسترده می‌باشد( Bull, 2003).
برای دستیابی به هدف مدیریت مشتریان به طور اثربخش به ادغام صحیحی از فناوری اطلاعات جدید، فرایندهایکسب‌وکار موثر، مدیریت اثربخش داده‌ها و نیات کاری جدید نیازمندیم البته در این میان چیزهای دیگری نیز در این چهارچوب لازم است که به مواردی اشاره می‌گردد:
-نیاز به راهبُرد، فرایند محوری در بسیاری از چهارچوب‌های فعالیت وجود ندارد که این خود به عنوان یک راهنما برایبه‌کارگیریCRM در شرکت‌ها به عنوان کلید عدم موفقیت CRM ثابت می‌شود.
-باید مشخص شود و نشان داده شود که CRMیک فرایند دو وجهی ایجاد ارزش است؛CRM موفق، به شرکت‌ها برای دریافت دیدگاه مشتریان، جهت به‌کارگیری اهدافش نیاز دارد.
-باید از طریق تجربی، کاربردی بودن و قابل‌اعتماد بودن آن ثابت شود.
چهارچوب‌های دیگری نیز وجود دارد ولی فرایند محور نبوده و CRM را به صورت وظایف متقاطع مفهوم‌سازینمی‌کنند.
Sue and Morin, 2001, p8))چهارچوبی برایCRM بر مبنای اهداف، نتایج و کمک‌های مورد انتظار ارائه کرده استولی فرایند محور نمی‌باشد.مدل مفهومی دیگری توسط Gartner (2001) ارائه شده است که شامل ۸ بلوک ساختمانی می‌باشد: چشم‌انداز، راهبُرد، تجربه مشتری باارزش، حمایت سازمانی، فرایندها، اطلاعات، استاندارد و فناوری.
مدل Payen and Frawتنها روشن‌کننده موضوع نیست بلکه توسط تحقیقات تجربی تأیید شده است. تمام ۵ فرایند شامل: فرایند توسعه راهبُرد، فرایند ایجاد ارزش، فرایند یکپارچه‌سازیکانال‌های چندگانه، فرایند مدیریت اطلاعات و فرایند ارزیابی عملکرد هست. که طبق نمونه وی به صورت زیر بکار برده می‌شود.( (Muazu, 2007, P29
شکل ۲-۶: مراحل به‌کارگیری مدیریت ارتباط با مشتری
در این مدل ارزیابی آمادگیCRM، مدیریت پروژه CRM و مدیریت تغییر به عنوان عواملی که در کلیه مراحل به‌کارگیری مورد توجه است بیان می‌گردد. قبل از به‌کارگیری، توسعه راهبُرد و داشتن اهداف روشن اولین گام می‌باشد و پس از به‌کارگیری توسط کارکنان ارزیابی عملکرد می‌تواند شرکت را در به‌کارگیری مدیریت ارتباط با مشترییاری رساند. یکی دیگر از چهارچوب‌هایارائه‌شده اخیر برای CRM ، مدل Winerمی‌باشد، که دارای ۷ فاز هست:
۱- ایجاد پایگاه داده: در این مرحله فرایند جمع‌ آوری داده جهت ایجاد پایگاه داده مورد تاکید می‌باشد. منابع داده معمول شامل ایجاد یک پایگاه درونی جهت جمع‌ آوری داده، خرید داده از منابع خارجی و یا جمع‌ آوری داده از بازاریابی و تبلیغات فروش می‌باشد.
۲- تجزیه و تحلیل پایگاه داده: در این مرحله داده‌هایجمع‌آوری شده به اطلاعات با معنی برای سازمان تبدیل می‌شوند. رویکرد معمول مورد استفاده در این مرحله ارزش دوره زمانی مشتریان و چهارچوب مالی، تازگی و فراوانیهست.

فضای اینترنت در دو کشور مصر و تونس( شرطی مساعد ، فرصتی مناسب ، عامل هویتی مشخص می باشد )
جهت ؟
رهبری جنبش بیشتر شده
مشارکت افراد در جنبش
بکار گرفتن ساختارهای روشن
افزایش حمایت افراداز جنبش
ارائه ارزشهاوهنجار های جدید
منابع مالی افزایش
جلب حمایت های داخلی و خارجی
تاکتیک های اعتراضی افزایش
کاهش مشروعیت نظام
تغییر رفتار مردم
ایجاد شکاف بین مسئولین و مردم
فرو پاشی نظام سیاسی حاکم و جایگزینی نظام سیاسی جدید
موفقیت جنبش اجتماعی
۷-۲-فرضیه های تحقیق :
بنابرمطالب ارائه شده در صفحات قبل و براساس کتب موجود در زمینه روش تحقیق هر پژوهشگری برای رسیدن به تحقیقی کامل و اصولی باید از قبل یک سری پیش فرض هایی را برای خودش تنظیم نماید تا در طول تحقیق مشخص شود که آیا فرض او درست است یا نادرست لذا در زمینه نقش اینترنت در جنبش های اجتماعی مورد پژوهی مصر و تونس فاکتورهای گوناگونی دخالت دارند عبارتند از:

1. 1. به نظرمیرسد هرچه دسترسی افراد به فضای اینترنت بیشترباشد احتمال مشارکت آنها درجنبش انقلابی بیشتر میشود .

1. 1. به نظر میرسد اینترنت در دوکشور مصر وتونس این امکان رابوجود آورده تاجنبش های مردمی رهبری شوند .

1. 1. به نظر میرسد فضای اینترنت این توانایی را داشته که گروههایی ازمردم دو کشور رابه سطحی از آگاهی برساند تا جنبش های مردمی رابه حرکت در آورند .

1. 1. به نظر می رسددرکشورهای مصروتونس ایدئولوژی جدیدی ازطریق فضای اینترنت برای حرکت های مردمی ایجاد شد .

1. 1. به نظر میرسد درکشور های مصر وتونس مشروعیت نظام های حاکم از طریق فضای اینترنت زیر سئوال برده شده است.

1. 1. به نظر میرسد درکشور های مصر وتونس فضای اینترنت توانسته است تاکتیک های اعتراضی را به مردم منتقل کند.

1. 1. به نظر میرسد درکشور های مصر وتونس فضای اینترنت توانسته حمایت های داخلی و خارجی سایر گروه ها را کسب نماید.

فصل سوم
روش شناسی
۱-۳-روش پژوهش
در این پژوهش هدف بررسی تاثیر فضای سایبری و اینترنت در تحولات سیاسی دو کشور مصر و تونس بوده است.دلیل اصلی انتخاب موضوع و دقیق کردن آن پاسخ به سئوالاتی بود که پس از بوجودآمدن تحولات سیاسی و اجتماعی در این دو کشور اتفاق افتاد و برای تدوین آن در حوزه جامعه شناسی سیاسی از لحاظ روش شناسی الزاماتی را قائل شد. از مراحل بنیادی و یکی از اصول اساسی هر مطالعه علمی و پژوهشی، روش تحقیق و جمع آوری اطلاعات مربوط به آن پژوهش است. در صورتی که کار جمع آوری اطلاعات به شکلی منظم و صحیح صورت پذیرد ، تجزیه و تحلیل و نتیجه گیری از داده ها با سرعت و دقت خوبی انجام خواهد شد. نسبت به موضوع، می توان از انواع مختلفی از شیوه های پژوهشی که درجامعه شناسی وجود دارند برای جمع آوری داده ها و تجزیه و تحلیل آنها بهره برد. از جمله آنها روش تحقیق کمی می باشد.
در این پژوهش که به شیوه ترکیبی(روش کمی و کیفی) صورت می پذیرد اطلاعات با روش مطالعه اسنادی، کتابها و تاریخی و تکنیک تحلیل محتوا جمع آوری می گردند و به شیوه اسنادی و تاریخی و آماری مورد تحلیل و بررسی قرار خواهند گرفت. .
۲-۳- ابزارهای اندازه گیری و جمع آوری داده ها:
بر اساس مطلب ذکر شده در بالا از دکتر ساروخانی ابزار گردآوری مطالب تحقیق به شیوه فیش برداری از مطالب موجود در کتب جنبش های اجتماعی ، مجلات و روز نامه ها، وبلاگ های خبر ی که در رابطه با موضوع تحقیق مطالبی را انتشار داده بودند . سپس به تحلیل محتوی فیلم های مستند در زمینه موضوع تحقیق پرداخته و از مطالب ذکر شده در آن فیش برداری نموده و در بخش های مربوط آنها را ذکر کرده ایم . جدول شماره (۱)

بنابراین در این پژوهش روش گردآوری اطلاعات در ادبیات تحقیق ، پیشینه و نظریه ها از فیش ، کپی یا زیراکس اطلاعات الکترونیک و در جمع آوری داده ها از پرسشنامه استفاده شده است .

حذف نویز در گفتارهای نویزی ضبط شده: که در آنها صدای ضبط شده اشخاص آغشته به نویز است و جهت بهبود کیفیت آنها، باید نویز را حذف کرد.
و موارد دیگر کاربرد …
هر یک از این کابردها، ممکن است هدف خاص خود را دنبال کنند. مثلا در برخی موارد، هدف، افزایش قابلیت درک گفتار می‌باشد، در حالی که در کاربردهای دیگر، کاهش خستگی شنونده هدف اصلی فرایند بهسازی گفتار می‌باشد. بدین ترتیب، در کاربردهای مختلف، روش ارزیابی کیفیت گفتار بهسازی شده را برای آن کاربرد تعریف می کنند.

۱-۴- طبقه بندی روش های های بهسازی گفتار
از آنجا که بسیاری از منابع و مراجع در بحث بهسازی گفتار، نویز را به عنوان اصلی ترین عامل تخریب سیگنال گفتار در نظر گرفته اند، در این پایان نامه، توجه ما نیز از میان عوامل مختلف تخریب سیگنال گفتار، روی نویز متمرکز می باشد. مسایل بهسازی گفتار، خانواده گسترده ای از مباحث را شامل می شود، بعضی از روش های بهسازی گفتار بر مبنای مدل آماری می باشند، در حالی که بعضی دیگر به جنبه های ادراکی گفتار توجه دارند. همچنین تکنیک های بهسازی گفتار را می توان بر حسب اینکه تک­کاناله^[۱۸] یا دوکاناله (یا چند کاناله^[۱۹]) هستند، تقسیم بندی کرد. در کاربردهای تک­کاناله، تنها یک میکروفن در دسترس است و لذا مشخص کردن خصوصیات نویز باید در فواصل زمانی سکوت بین گفتارها انجام شود. در الگوریتم های دو کاناله، امواج صدا در هر سنسور با اختلاف زمانی کمی می رسند و به شکل طبیعی، یکی تاخیر یافته دیگری است. تکنیک های بهسازی دو یا چندکاناله بر مبنای دو سناریو هستند: اول اینکه کانال اصلی شامل گفتار آغشته به نویز و کانال دوم شامل نویز دارای همبستگی با نویز کانال اصلی است. عموما یک حامل صوتی بین سنسورها وجود دارد تا اطمینان حاصل شود که هیچ گفتاری به کانال مرجع نویز نشت نکرده است. در سناریوی دوم نیز هیچ حامل صوتی وجود ندارد. در نتیجه عوامل مؤثر بر سیستم بهسازی گفتار عبارتند از:
نوع نویز
چگونگی برهم­کنش نویز با سیگنال اصلی
تعداد کانال یا میکروفن در دسترس
نویز ممکن است ناشی از همهمه، باد، ترافیک، کارخانه، اتومبیل و … بوده و در واقع از لحاظ طیفی، دارای شکل های مختلفی باشد و لذا اثرات مختلفی را روی سیگنال گفتار بر جای بگذارد. به عنوان مثال، نویزهای با محتوای فرکانسی ۵۰۰ هرتز تا ۵ کیلوهرتز به شدت قابلیت درک گفتار را کاهش می دهند، در حالی که نویزهای حاوی انرژی در فرکانس های بالای ۵ کیلوهرتز، اگرچه باعث خستگی شنونده می شوند، ولی در قابلیت درگ گفتار اثر ناچیزی دارند.
چگونگی برهم کنش نویز با سیگنال اصلی نیز مساله مهمی است که بر سیستم بهسازی تاثیر می گذارد. نویز ممکن است با سیگنال گفتار جمع، ضرب یا کانوالو^[۲۰] شود. همچنین امکان مستقل یا وابسته بودن نویز به سیگنال اصلی نیز وجود دارد. مساله ماهیت ناایستان^[۲۱] نویز در بسیاری از منابع نویز، مساله ای است که سیستم بهسازی گفتار را ملزم به نوعی تطبیق زمانی می نماید.
پارامتر مهم دیگر، تعداد کانال ها یا میکروفن هایی است که سیستم بهسازی گفتار از آنها استفاده می کند. به عنوان مثال، وجود یک میکروفن دوم برای داشتن نویز مرجع در کنار میکروفن اول که سیگنال گفتار نویزی را دریافت می کند، موجب می گردد تا سیستم از خواص آماری و طیفی نویز مطلع گشته و در ضمن بتواند ناایستانی نویز را به خوبی دنبال کند. براساس پارامترهای به کار رفته، سیستم های غنی سازی گفتار به چندین اسلوب و شیوه قابل تقسیم بندی اند (جدول ۱-۱).
جدول (۱-۱): تکنیک های مختلف غنی سازی گفتار

در این فصل به این دلیل که بیشتر انواع سیستم های غنی سازی موجود در اکثر کاربردها از نوع تک کاناله می باشد، بحث و بررسی خود را به سیستم های تک کاناله معطوف می کنیم.
۱-۴-۱- کاهش نویز با بهره گرفتن از خاصیت تناوبی گفتار
این روش ها از طبیعت شبه متناوب سیگنال گفتار بهره می گیرند. سیگنال های صدادار گفتار^[۲۲] در طبیعت با فرکانس پایه مشخص می شوند که از شخصی به شخص دیگر متغیرند. با این حال، چنین تکنیک هایی به شدت، به تخمین درست تناوب گام^[۲۳] سیگنال (عکس فرکانس گام) صدای گوینده وابسته اند.
یکی از روش های ساده بر این مبنا روش فیلترهای شانه­ای وفقی^[۲۴] ]۴[ است. در این روش از یک سری از فیلترها برای فیلتر کردن محتویات فرکانسی بین فرکانس اصلی و هارمونیک های آن استفاده می شود. روش دیگر در این زمینه، تکنیک حذف نویز وفقی تک کاناله^[۲۵] ]۵[ می باشد. در این روش، نسخه تاخیر یافته سیگنال به عنوان ورودی به فیلتر LMS^[26] در نظر گرفته می شود و در عین حال خود سیگنال به عنوان سیگنال مرجع استفاده می شود. در این روش، تاخیر، نویز را در سیگنال ورودی با آنچه که در سیگنال مرجع حضور دارد ناهمبسته می کند و وقتی که تاخیر برابر با تخمینی از پریود گام سیگنال باشد، آنگاه در محتویات گفتار دو سیگنال همبستگی وجود دارد. شکل (۱-۷) بلوک دیاگرام یک سیستم مبتنی بر این تکنیک را نشان می دهد.
شکل۱-۷- بلوک دیاگرام یک سیستم بهسازی مبتنی بر خاصیت تناوبی گفتار
که در آن  ،  و  به ترتیب سیگنال گفتار تمیز ، نویز و سیگنال نویزی می باشند. یکی از عیوب اساسی این روش ها این است که بهبود چشمگیری در کیفیت نواحی گفتار بی صدا^[۲۷] دیده نمی شود. همچنین استفاده از یک الگوریتم دقیق تخمین و استخراج گام جهت حصول کارایی مناسب در این الگوریتم ها الزامی است.
۱-۴-۲- غنی سازی گفتار بر اساس مدل
این دسته از سیستم های غنی سازی گفتار گاهی با نام روش غنی سازی بر مبنای مدل آماری معرفی شده اند [۶]. در مواقعی که دانش و معلوماتی نسبت به مشخصات آماری سیگنال گفتار یا نویز نداریم و به جای آن از مدل هایی مانند مدل صفر- قطب، مدل تمام قطب و یا مدل تمام صفر استفاده کنیم، به کارگیری چنین روش هایی موسوم است. درعوض، مدل های تولید گفتار مانند ^[۲۸]ARMA، AR^[29]، و یا ^[۳۰]MA استفاده می شوند. بر این اساس، پارامترهای مدل سیگنال گفتار تخمین زده شده و سپس توسط بازسازی بوسیله پارامترهای مدل گفتار یا با بهره گرفتن از یک فیلتر کالمن یا وینر، سیگنال بهسازی شده تخمین زده می شود.
فیلتر وینر، تکنیک وفقی مشهوری است که در بسیاری از روش های بهسازی گفتار به کار گرفته شده است. مبنای اصلی فیلتر وینر تخمین یک فیلتر بهینه از گفتار نویزی ورودی است که با مینیمم کردن ^[۳۱]MSE بین سیگنال مطلوب  و سیگنال تخمینی  حاصل می شود. این فیلتر در حوزه فرکانس از رابطه زیر حاصل می شود:

• حشیش: حشیش ماده‌ای است به رنگ سبز تیره و گاهی قهوه‌ای مایل به سبز شبیه حنا. این ماده مخدر از صمغ گلها و قسمت انتهایی گیاه تولید می‌شود و حاوی ماده‌ای شیمیایی به نام تترا هیدرو کاتابیول (T.H.C) است که ماده‌ای بسیار قوی و خطرناک می‌باشد و یکی از ترکیبات فعال شاهدانه است. این ماده شیمیایی یک ترکیب حلال، قوی و توهم زا است و اثرات آن شبیه به ال اس دی است.

اثرات حشیش در عرض چند دقیقه پس از مصرف ظاهر می‌شود و فرد پس از مصرف احساس آرامش و راحتی می‌کند. از جمله اثرات آن، اضطراب، افسردگی، هیجان، تحرک زیاد، گرسنگی است. مصرف حشیش بر خلاف سایر مواد مخدر از جمله تریاک ، هروئین ، مرفین، وابستگی جسمی ایجاد نمی‌کند و تنها وابستگی روانی این ماده قابل ملاحظه است و به همین دلیل بسیاری از پزشکان این ماده را اعتیاد آور نمی‌دانند.

• ماری جواما(بنگ): از قسمت های فوقانی برگ‌ها، گل‌ها و تخمه‌های شکفته شده بوته شاهدانه جنس ماده که بریده و خشک شده تهیه می‌شود. ماری جوانا یک ماده مخدر سبک و ملایم است و تاثیراتش از بقیه فراورده‌های شاهدانه ضعیف تر است . از اثرات استعمال آن، حالت سرخوش ، اختلال در هوشیاری و ادراکات، عدم توازن و اغتشاش فکری است.

ح. داروهای نامرئی یا فراموش شده :
این مواد که در اصطلاح به الکل، نیکوتین و کافئین اطلاق می‌شود در واقع سه گروه از موادی را شامل می‌گردد که به طور وسیع و گسترده مورد مصرف قرار می‌گیرند، اما بیشتر مصرف کنندگان این داروها تشخیص نمی‌دهند و یا غفلت می‌کنند که این مواد جزء داروهای اعتیاد آور و زیان بخش هستند.
۱- الکل: از نظر طبقه بندی فارماکولوژی، الکل تضعیف کننده سیستم مرکزی اعصاب است. برای تهیه الکل از شیوه‌های تخمیر مواد نشاسته‌ای و قندی و یا از شیوه‌های سنتز یا مصنوعی استفاده می‌شود.

الکل تا هنگامی که به مقدار لازم و معینی مصرف شود هیچگونه علامت ظاهری از خود نشان نمی‌دهد و هیچ تغییری در حالت آگاهی شخصی به وجود نمی‌آید. بعد از این مرحله مستی کمی پدیدار می‌شود و خلق و خوی فرد تغییر می‌کند و با مصرف بیشتر مستی سنگین تر می‌شود. اثرات الکل دارای دو جنبه مهم و اساسی است یکی اثر آزاد کننده غرایز و دیگری اثر تخریبی بر ضمیر آگاه انسان ، آزادی غرایز از سطح به سمت عمق صورت می‌گیرد، یعنی ابتدا غریزه جنسی و سپس غریزه خشونت آزاد می‌گردد.
مصرف دائمی الکل وابستگی فیزیکی و روانی تولید می‌کند که با تحمل ارگانیسم همراه است و این تحمل از نوع معموس است یعنی رفته رفته مقدار نسبتاً کمی الکل می‌تواند باعث واکنش‌های ارگانیسم به همراه شدت اولیه گردد، تغییر حالات آگاهی در الکلیسم مزمن به صورت‌های خفیف، حاد، یا مزمن ظاهر می‌شود اما وجه مشترک آنها اغتشاش روانی یا ذهنی کم و بیش عمیق است.^[۵۳]
۲- نیکوتین : توتون، برگ‌های خشک شده گیاه تنباکوست که می‌تواند به صورت کشیدنی و احیاناً جویدنی در اشکال مختلف مورد استفاده قرار گیرد. از ترکیبات خطرناک توتون نیکوتین تارومنوکسید کربن.
توتون تحریک کننده و تضعیف کننده سیستم مرکزی اعصاب است. تار موجود در سیگار در ریه‌ها جمع می‌شوند و موجب ناراحتی‌های دستگاه تنفس از جمله برونشیت مزمن، تنگی نفس، افزایش فشار خون و … می‌گردد. دو یا سه قطره نیکوتین می‌تواند موجب مرگ آنی باشد و هر نخ سیگار کمتر از یک میلی گرم نیکوتین را وارد خون می‌کند.^[۵۴]
کافئین: پودر کریستالی شکل سفید است با طعم تلخ که در دانه‌های قهوه، برگ چای برگ‌های کاکائو و دانه‌های کولا وجود دارد. کافئین نیز مانند سایر آمفتامین اعتیاد آور است و این قبیل داروها مسکن‌هایی هستند که انسان را از درد جسمانی راحت کرده ولی اجتماعی دیگر چون اعتیاد برایشان خلق می‌کند و کافئین عبارت است از افزایش متابولیسم، افزایش فشار خون، تقلیل خواب، تحریک ترشحات اسید معده، کاهش اشتها و افزایش قند خون. استفاده منظم و مرتب بیش از ۶۰۰ میلی گرم کافئین در روز موجب بی خوابی مزمن، اضطراب و افسردگی می‌شود. ^[۵۵]
گفتار دوم: عوارض و ناهنجاری‌های ناشی از اعتیاد
مصرف طولانی مدت مواد، موجب اختلال در بهداشت و سلامتی جسمی و روانی فردی می‌شود که با بروز بسیاری از بیماری‌های مزمن و خطرناک همراه است. البته از آنجا که اعتیاد بیشتر به هنگام ایجاد و ساخت خانواده و در ارزشمندترین سالهای زندگی از نظر میزان کارایی رخ می‌دهد، مشکلات رفتاری ناشی از اعتیاد بیشترین تاثیر را بر زندگی خانوادگی و شغل فرد می‌گذارد. مواد مخدر تنها به فرد مصرف کننده آسیب نمی‌رساند بلکه به هر کس که با آن در تماس باشد آسیب می‌رساند و زمانی که تعداد معتادان فراتر از حد قابل جبران باشد، جامعه صدمه می‌بیند. اعتیاد خسارت و هزینه‌های بسیاری را به جامعه تحمیل می‌کند.
بنابراین عوارض و ناهنجاری‌های ناشی از اعتیاد شامل عوارض فردی، خانوادگی، اجتماعی، اقتصادی، سیاسی و فرهنگی می‌باشد و در کتب و پژوهش‌های مختلف علمی بعضاً به تفصیل در مورد این ناهنجاری‌ها بحث شده که در مبحث قبل به عوارض جسمی و روانی مصرف مواد مخدر اشاراتی شد ولیکن در این مبحث به صورت اجمال به عوارض و ناهنجاری‌های دیگر استعمال مواد مخدر اشاره می‌گردد.
بند اول ـ عوارض و ناهنجاری‌های اجتماعی اعتیاد
اعتیاد به مواد مخدر یکی از پیچیده‌ترین آسیب‌های اجتماعی و از مصادیق عمده انحرافات محسوب می‌شود. سوء مصرف مواد مخدر بر رفتار و روابط فرد با دیگران آثار زیان بخشی بر جای می‌گذارد. در واقع، دگرگونی‌های سریع در رفتار، کاهش کارایی، فریب دیگران و تدبیر دیگری که معتاد برای رسیدن به ماده اعتیاد آور به کار می‌برد، سبب سلب اعتماد افراد از معتاد می‌شود و شخصیت وی را دچار تزلزل و بی ثباتی می‌کند. امروزه اعتیاد به مواد مخدر یک مسئله و پدیده اجتماعی است که امکان دارد زندگی سالم را از فرد و جامعه سلب کند.^[۵۶]
در اثر انحطاط شخصیت و عدم تعادل روانی، رابطه شخص معتاد و تمام انسان‌های دیگر خود به خود قطع می‌شود و پس از گرفتاری در دام اعتباد دیگر او چنان رابطه عادی، طبیعی، فطری، روحی، معنوی و قلبی را با هیچ کس حتی پدر و مادر و خواهر و برادر و اولاد خود نیز پیدا نمی‌کند.
به طور کلی معتاد نه تنها نمی‌تواند مولد و سازنده باشد، بلکه مصرف کننده‌ای است که غیر از ضرر اجتماعی هنر دیگری ندارد. فرد معتاد نسبت به اعضای خانواده خود احساس مسئولیت نمی‌کند و موقعیت اجتماعی او متزلزل و بعضاً حتی فاقد موقعیت اجتماعی است. معتاد به دیگران اعتماد ندارد و برآوردن نیازهای خود را مقدم بر دیگران می‌داند. همین طور روابط اجتماعی وی بسیار سطحی و تصنعتی است و به قدرت می‌تواند پیونده‌های مستحکم عاطفی و وفاداری و تعهد داشته باشد. در واقع توجه یک فرد معتاد بیش از اینکه به خود و خانواده خود باشد به کسی است که بتواند برای وی مواد مخدر تهیه کند.^[۵۷]
نکته حائز اهمیت اینکه عموماً آثار زیان بار اجتماعی مصرف مواد مخدر از واحد خانواده آغاز می‌شود . به این نحو که یک فرد معتاد نمی‌تواند وظایف همسرداری ، پدری و دیگر تکالیف خود را در خانواده به خوبی انجام دهد و قطعاً برای خانواده خویش مشکلاتی ایجاد می‌کند. یعنی معتاد انسانس است فاقد استعدادهای (انس و عاطفه) فطری اولیه یا به عبارتی دیگر او حتی نسبت به خویش و خویشاوندان نزدیک خود نیز بیگانه محض است.
از نظر اجتماعی هم، چون از عوارض قهری اعتیاد، بی علاقه شدن به کار و شغل است. لطمات جبران ناپذیری به اقتصاد جامعه وارد می‌سازد و از طرفی به خاطر اینکه به دنبال همدرد می‌گردد باعث معتاد شدن دیگر افراد جامعه می‌شود و در مواردی دیده شده که معتاد باعث معتاد نمودن و روسپیگری همسر خود نیز می‌شود و در روابط اجتماعی اعضای خانواده‌های پدر معتاد ، به جای مهر و عطوفت، خشونت حاکم می‌شود و اعضای خانواده به جای احساس راحتی و غرور بیشتر احساس شرم و خجالت می‌کنند.^[۵۸]
بند دوم ـ عوارض و ناهنجاری‌های اقتصادی اعتیاد
اعتیاد از جمله پدیده‌هایی است که عوارض اقتصادی بسیاری بر جامعه تحمیل می‌کند. امروزه مواد مخدر یکی از عوامل مهم بیماری اقتصادی و به خطر افتادن بهداشت و سلامت جوامع بشر به حساب می‌آید از آن جایی که لازمه اعتیاد مصرف روز افزون مواد مخدر بوده و مواد مخدر نیز هزینه‌های هنگفتی در بر دارد اولین ضربه اقتصادی را به خود شخص مصرف کننده و خانواده و زن و فرزند او وارد می‌کند. علاوه بر آن تعداد جوانان و نوجوانان فعال بیشماری که در جریان خرید و فروش مواد مخدر امر قاچاق دست از کار مفید تولیدی کشیده و متقابلاً به ضرر جامعه مواد مهلک را پخش می‌کنند این امر نه تنها به ضرر اقتصاد کشور است موجب هلاکت و از کار افتادن نیروهای خلاق آینده نیز می‌باشد.
مصرف کنندگان و معتادین که به گواهی روز و طبق آمارهای ارائه شده هر روز در حال فزونی و افزایش بوده و گروه انبوهی از جوانان جهان و ایران در دام آن گرفتار و در اثر اعتیاد نه تنها از کار و فعالیت مفید دست کشیده و در کار تولید نقشی ندارند بلکه خود نیز سربار جامعه می‌شوند.^[۵۹]
اگر پول‌هایی را که برای مبارزه با عرضه و مصرف مواد مخدر در جهان هزینه می‌گردد در کنار ارزی که برای خرید مواد مخدر و نیز دارو برای درمان معتادین و درمان امراض ناشی از مصرف مواد مخدر قرار دهیم بیش از پیش به خسارات و ضربه‌های اقتصادی هنگفتی که از این پدیده، به کشورها وارد می‌آید واقف می‌شویم.
بدیهی است چنانچه این مبالغ به اضافه نیروهای انسانی مصرف کنندگان و سایر هزینه‌های جانبی صرف توسعه علم و صنعت و رفاه جامعه می‌شد، شاهد رشد و توسعه همه جانبه هر چه بیشتر کشورها می‌شدیم . از طرف دیگر، استفاده از مواد مخدر نه تنها به تولیدات و خودکفایی جامعه لطمه می‌زند بلکه سلطه و استثمار قدرت‌های بیگانه را نیز به همراه خواهد داشت و موجب نارسایی‌های اقتصادی و مالی در داخل جوامع می‌گردد و بدیهی است که هر گونه نارسایی اقتصادی در جوامع، موجب تثبیت نظام قاچاقچی گری شده و ثروت‌های باد آورده در این راه ، افراد فقیر و ناآگاه را به سمت خرید و فروش مواد و اعتیاد می‌کشاند.^[۶۰]
بدین ترتیب، مسائلی همچون خسارات ناشی از کاهش نیروی مولد و افزایش معتادین، صرف وقت دادگاه هزینه نگهداری مجرمین مواد مخدر و معتادان در زندان‌ها، هزینه مراکز بازپروری و درمانگاههای ترک اعتیاد ، هزینه‌های نیروی انتظامی برای مبارزه با جرایم مواد مخدر، خسارات ناشی از مراقبت‌های بهداشتی شامل بیمارستانها و درمانگاهها از عوارض اقتصادی اعتیاد به شمار می‌آیند.
بند سوم ـ عوارض و ناهنجاری‌های سیاسی اعتیاد
از نظر سیاسی معتادان به قوانین جامعه توجهی ندارند و در مواقع لزوم قادر به فعالیت در امور نظامی و سیاسی نیستند. معتادان افرادی بی تفاوت‌اند و به جریانات سیاسی مملکت کاری ندارند. زیرا این افراد همواره اسیر و برده مواد مخدرند و فرصت پرداختن به فعالیت‌های سیاسی و اجتماعی را ندارند. از طرف دیگر همواره استعمارگران با توسعه اعتیاد در جوامع تحت نفوذ خود در صدد آن هستند که ممالک مختلف را در ابعاد اقتصادی ، اجتماعی و سیاسی به استیصال و نابودی بکشند تا به چپاول و غارت منابع طبیعی و انسانی جوامع ادامه دهند.
تزویج ابتذال ، بی بند و باری، پوچگرایی به مواد مخدر و فساد جنسی همواره به صورت ابزاری موثر و کارساز توسط استعمارگران برای زوال شخصیت و ضعف قوای جسمانی نسل بلند آوازه و آینده ساز کشورها به کار گرفته می‌شود تا استقلال و عزت و شرف را در روح و جان جوانان و نوجوانان محو سازد و آنان را به موجودی بی اراده و سست عنصر و بی انگیزه و لاابالی و محتاج تبدیل نمایند.
فصل چهارم:
علل گرایش جوانان و نوجوانان به مواد مخدر در شهرستان کاشان
علل گرایش جوانان و نوجوانان به مواد مخدر در شهرستان کاشان
شهرستان کاشان با وسعت ۹۶۴۷ کیلومترمربع و جمعیت ۳۳۵۷۸۵ نفر از توابع استان اصفهان بوده و از نظر جمعیت دومین شهرستان این استان به حساب می آید. کاشان دارای چهار بخش (مرکزی, قمصر, نیاسر و برزک) بوده و دارای پنج شهر (کاشان, قمصر, نیاسر, جوشقان و برزک) می باشد.
شهرستان کاشان از لحاظ میراث فرهنگی جزء پنج شهر اول ایران بوده و از لحاظ صنعتی نسبت به شانزده استان کشور رتبه بهتری دارد.
شهر کاشان که مرکز شهرستان می باشد با مساحت ۸۵۰۰ هکتار و جمعیت ۲۰۱۳۷۲ نفر, دارای یک نماینده مجلس و ۹ نماینده شورای شهر می باشد
کاشان به علت واقع بودن بر سر راه های تجارتی و ارتباطی در تمامی ادوار از اهمیت ویژه ای برخوردار بوده است.
زمانی در کنار جاده ابریشم واقع بوده و در رونق و آبادانی شهر سهم بسزایی داشته است و در حال حاضر نیز بر سر شاهراه ارتباطی بسیار مهمی قرار دارد که پایتخت را به شهرهای جنوبی کشور ارتباط می دهد. این شاهراه کاشان را از طرفی به قم و تهران و از طرفی دیگر به شهرهای جنوبی کشور همچون نائین، یزد ، کرمان، بندرعباس و … مربوط می سازد. خصوصا با تکمیل اتوبان قم ـ اصفهان این ارتباط سهل الوصول تر شده است. و همچنین کاشان با قرار گیری در مسیر راه آهن تهران ـ اصفهان ، تهران ـ یزد و کرمان توسعه و گسترش اقتصادی و رشد افزون تری را پیدا کرده است.
اوضاع و احوال و موقیت جغرافیایی هر شهر و حتی هر منطقه ای در اعتیاد و نوع آن متفاوت است . ساکنین شهرها و روستاهایی که در مسیر عبور مواد مخدر هستند به علت سهولت دسترسی به مواد مخدر و همکاری با قاچاقچیان بیشتر در معرض خطر اعتیاد به مواد مخدر قرار دارند. شهرستان کاشان به واسطه قرار گرفتن در محور مواصلاتی و ترانزیتی و همجواری با شهرهای مرکزی کشور ، مهاجر پذیری و گسترش شهرک های صنعتی و گسترش شهر نشینی و دیگر عوامل، یکی از شهرستان هایی است که از نظر وقوع جرم علی الخصوص ،تهیه ،توزیع و مصرف مواد مخدر با افزایش قابل ملاحظه ای مواجه بوده است . در این میان جوانان بیشتر از اقشار دیگر جامعه در معرض خطر قرار دارند چون کاشان یکی از شهرهای مهاجر پذیر بوده و بخش قابل توجهی از آن را جوانان و نوجوانان تشکیل می دهند پدیده اعتیاد به عنوان یکی از مهمترین خطرات احتمالی موجود برای جوانان در این شهرستان به میزان زیادی قابلیت اشاعه داشته و گریبان گیر جوانان در این شهر است.
بسیاری از جوانها و حتی پدر و مادر ها فکر می کنند که دلیل اعتیاد فرد، اصرار دوستان است. در حالی که این تنها انگیزه سوء مصرف مواد در جوانان نیست. اگر بخواهیم انگیزه های مصرف مواد مخدر جوانها را بشناسیم، فهرست بلند بالایی میشود،
کنجکاوی، کسب لذت، تسکین درد، فراموش کردن مشکلات، شوخی و خنده، هیجان طلبی یا میل به خطر کردن، احساس بزرگ شدن، پیوستن به گروهی خاص و … این علل با وجود این که چندان مهم به نظر نمی رسند، باعث اعتیاد میلیونها انسان شده اند. بیشترین علت اعتیاد جوانان در ایران دو عامل کنجکاوی و کسب لذت است.
امروزه متخصصین، یک عامل را زمینه ساز اعتیاد نمی دانند و معتقدند عوامل مختلف دست به دست هم میدهند و فرد را معتاد می سازند. این عوامل تشکیل شده اند از عوامل فردی ( عوامل روانی، زیستی، و بیولوژیک)، عوامل خانوادگی و عوامل اجتماعی، هر کدام از این سه عامل به تنهایی نیز قادرند تا موجب گرایش فرد به اعتیاد شوند.
یکی از مهمترین عوامل گرایش جوانان و نوجوانان به مصرف مواد اعتیاد آور کنجکاوی و هیجان طلبی است.
در این بخش ابتدا آمار و ارقام علل اعتیاد جوانان شهر کاشان که از طریق پرسشنامه تهیه گردیده می پردازیم سپس علل و عوامل گرایش به مواد مخدر در شهرستان کاشان مورد بررسی قرار خواهد گرفت.
گفتار اول: عوامل فردی
بسیاری از روان شناسان علل رفتارهای انحرافی را بر حسب نقص شخصیت فرد کجرو توجیه می کنند و بر این باورند که برخی از گونه های شخصیت، بیشتر از گونه های دیگر، گرایش به تبهکاری و ارتکاب جرم دارند. علل فردی گرایش به اعتیاد بیشتر بر مبنای نظری دیدگاه های روان شناختی متکی می باشند. در بسیاری از جوامع کنونی،‌اعتیاد به اشکال گوناگونی بروز کرده است. تا کنون اعتیاد به مواد مخدر، یکی از مشکلات بزرگ بهداشتی بوده، ولی امروزه اعتیاد به قمار، مسائل جنسی و اینترنت نیز به لیست مشکلات بهداشتی اضافه شده است. بسیاری از عوامل دست به دست یکدیگر داده و فرد را به سمت اعتیاد سوق می دهند. اگر علت اعتیاد را فقر بدانیم، معتادان متمول را نادیده گرفته ایم و اگر بیسوادی را مطرح کنیم قشر معتادان تحصیل کرده را نادیده گرفته ایم. پس نمی توان به تنهایی یک عامل را علت ایجاد اعتیاد دانست. به همین دلیل امروزه اعتقاد بر این است که اعتیاد، معلول مشکلات جسمی، روانی و اجتماعی است. اگر همه عوامل به وجود آورنده اعتیاد مهیا باشد، باز در نهایت این خود فرد است که برای مصرف مواد تصمیم می گیرد. پس باید توانایی های فردی را ارتقا بخشید تا شخص بتواند در مواقع خطر، خود را از چنگال اعتیاد دور سازد. در بین عوامل فردی حفاظت کننده می توان از مهارت های زندگی یاد کرد. مهارتهای زندگی طیف وسیعی از توانائیها هستند که مسلح شدن به هر یک از آنها شخص را در مراحل مختلف زندگی یاری خواهد داد تا با قدرت بیشتری در برابر مشکلات مقاومت کند. این مهارتها عبارتند از : مهارت حل مشکل، قدرت تصمیم گیری، توانایی نه گفتن، هنر دوست یابی و … که اگر امروز این مهارتها را به فرزندان خود نیاموزیم، فردا در غیاب ما، در مقابل اصرار دوستان، قدرت مقاومت نخواهند داشت.

۱۲- به مدت ۱ دقیقه میکروتیوب را در ۰۰۰/۱۵ دور سانتریفیوژ کرده تا تمامی ترکیبات جامد ته نشین شود . اینک محلول رویی حاوی DNA تخلیص شده است.
۳-۵-۲ لایگیشن
برای اتصال DNA ناحیهC2 پروتئینALCAM استخراج شده از ژل، با پلاسمید بیانی pet-28a در آزمایشگاه از آنزیم لیگاز^[۵۱] استفاده می شود که می تواند اتصالات فسفودی استری شکسته شده را ترمیم کند. این آنزیم از فاژ T4 استخراج شده است و انرژی لازم برای فعالیت خود را از ATP تامین می کند و می تواند هم انتهاهای صاف و هم چسبنده را به هم متصل کند.

روش انجام این عمل به شکل زیر است:
۱- محتویات واکنش را بصورت زیر مخلوط می کنیم.
بافر لایگیشن x 10 : 3 میکرولیتر
آب استریل: ۹ میکرولیتر
DNA لیگاز T4 : 1 میکرولیتر
پلاسمید Pet-28a : 2 میکرولیتر
Insert (DNA ناحیهC2 پروتئینALCAM) : 15 میکرولیتر
حجم نهایی: ۳۰ میکرولیتر
نکته : در آخرین مرحله آنزیم T4، DNA لیگاز اضافه شود. چون اگر بعد از اضافه کردن آنزیم T4 ، محلول برای مدت طولانی در محیط بماند با توجه به قدرت بالای اتصال T4 اتصال های که مورد نظر ما نیست اتفاق خواهد افتاد.
۲- به کمک دستگاه ترموسایکلر میکروتیوب حاوی مخلوط واکنش را به مدت ۴ ساعت در ۱۶ درجه سانتیگراد سپس به مدت یک شب در دمای ۴ درجه سانتیگراد قرار می دهیم .
۳-۵-۳ ترانسفورماسیون
برای این مرحله از سویه E.coli BL21(DE3) که یکی از رایج ترین سویه های کلونینگ است استفاده می کنیم . این باکتری به تنهایی حساس به کانامایسین است ولی وقتی وکتور pet-28a را جذب می کند نسبت به آنتی بیوتیک مقاوم شده و بر روی آگار حاوی کانامایسین رشد، و تشکیل کلونی می دهد .
۳-۵-۳-۱ آماده سازی سلول های شایسته
۱- باکتری در محیط کشت فاقد کانامایسین کشت داده شد.
۲- پس از ۲۴ ساعت نگهداری در انکوباتور ، یک تک کلونی را برداشته و به ۵ میلی لیتر محیط LB مایع بدون کانامایسین تلقیح می کنیم و سپس به مدت یک شب تا صبح(over night) در شکیرانکوباتور قرار می دهیم تا باکتری رشد کنند.
۳- ۴۰۰ میکرولیتر از محیط فوق را به ۵ میلی لیتر محیط LB مایع تازه تلقیح نموده و مجددا در شیکرانکوباتور قرار می دهیم . ۲ تا ۳ ساعت بعد محیط کدورت مناسب یعنی جذب ۵/۰ تا ۸/۰ در۵۰۰ نانومتر را به ما می دهد.در این حالت باکتری ها در مرحله فاز رشد لگاریتمی قرار دارد.
۴- باکتری هایی که تازه شده و در فاز لگاریتمی تکثیر می باشند را در چند میکروتیوب استریل تقسیم کرده و ۵ الی ۱۰ دقیقه روی یخ نگه می داریم .
۵- میکروتیوب ها را ۳ دقیقه در ۹۰۰۰ دور سانتریفیوژ می کنیم.
۶- مایع روئی را دور ریخته و رسوب باکتری را در یک میلی لیتر محلول استریل ۱/۰ مولار کلرید کلسیم حل می کنیم .
۷- ۲۰ تا ۳۰ دقیقه محلول مذکور را روی یخ انکوبه می کنیم .
۸٫سپس محلول را به مدت ۳ دقیقه در۹۰۰۰ دور سانتریفیوژ می کنیم. و محلول روی را دور ریخته
۹- این بار رسوب را در ۶۰۰ میکرولیتر محلول کلرید کلسیم استریل ۱/۰ مولار حل می کنیم .
۱۰- ۲۰ تا ۳۰ دقیقه محلول را روی یخ انکوبه می کنیم.
۱۱- سپس محلول را به مدت ۳ دقیقه در۹۰۰۰ دور سانتریفیوژ می کنیم. و محلول روی را دور ریخته
۱۲- رسوب را در ۳۰۰ میکرولیتر محلول کلرید کلسیم استریل حل میکنیم.
۱۳- به مدت ۲۰ دقیقه محلول را بر روی یخ قرار می دهیم.
این باکتری ها را می توان برای مدت ۷۲ ساعت روی یخ در یخچال نگهداری کرد و همچنین می توان با افزودن گلیسرول استریل ۳۰ درصد آن ها را در ۷۰- درجه سانتیگراد به مدت چند ماه نگهداری کرد .
۳-۵-۳-۲ ترانسفورماسیون سلول های شایسته E.coli BL21(DE3) با محصول لایگیشن به روش شوک حرارتی
۱- ابتدا ۱۰۰ میکرولیتر از سلول های مستعد E.coli BL21(DE3) را روی یخ ذوب می کنیم.
۲- ۳۰ میکرولیتر از محصول لایگیشن را به ۱۰۰ میکرولیتر از سلول های مستعد اضافه می کنیم به طوری که کاملا با هم مخلوط شوند.
۳- این مخلوط را به مدت ۳۰ دقیقه بر روی یخ انکوبه می کنیم.
۴- نمونه ها را به مدت ۹۰ ثانیه در بن ماری ۴۲ درجه سانتیگراد قرار می دهیم و بلافاصله به مدت ۵ دقیقه روی یخ قرار می دهیم، بدون حرکت و کاملا ثابت.
۵- مخلوط فوق را به ۹۰۰ میکرولیتر از محیط LB مایع فاقد کانامایسین افزوده و آن را به مدت ۵/۱ ساعت در شیکر انکوباتور ۳۷ درجه قرار می دهیم تا باکتری های ترانسفورم شده بتواند شروع به تکثیر نمایند.
۶- مخلوط فوق را به مدت ۳ دقیقه در ۹۰۰۰ دور سانتریفیوژ می کنیم .
۷- ۸۰۰ میکرولیتر از مایع روئی را دور ریخته و رسوب را در ۲۳۰ میکرولیتر باقی مانده، به خوبی حل می کنیم .
۸- ۲۳۰ میکرولیتر را روی یک پلیت حاوی LB آگار کانامایسین دار ریخته و کشت سه قسمتی می دهیم ، اجازه می دهیم کاملا جذب محیط شده و سپس آن ها را به مدت ۱۸ تا ۲۰ ساعت در انکوباتور ۳۷ درجه نگهداری می کنیم .
۳-۵-۴ ارزیابی کلونی ها
پس از مدت۱۸ تا ۲۰ ساعت در انکوباتور باکتری BL21 بر روی محیط کشت تشکیل کلونی می دهد. یک تک کلونی را جدا کرده و در ۵ میلی لیتر محیط LB براث کانامایسین دار تلقیح می نمائیم و به مدت
یک شب در ۳۷ درجه و با سرعت مناسب در شیکر انکوباتور قرار می دهیم. با رشد باکتری در این محیط تایید می شود که باکتری Bl21(DE3) ، پلاسمید بیانی pet-28a حاوی ژن ما را دریافت کرده است.
۳-۵-۵ استخراج پلاسمید بیانی pet-28a حاوی ژن ناحیه C2 پروتئیین ALCAM
جهت تایید وجود پلاسمید pet-28a در باکتری و عدم وجود هرگونه آلودگی در محیط کشت نیاز است که وجود پلاسمید مورد نظر تایید شود، بدین منظور از محیط کشت حاوی باکتری ترانسفورم شده BL21(DE3) استخراج پلاسمید صورت گرفت.
۱- از محیط کشت حاوی باکتری ترانسفورم شده که به مدت یک شبانه روز در دمای ۳۷ درجه انکوبه شده است و کاملا بصورت کدر درآمده است ، ۵/۱ میلی لیتر جدا کرده و داخل میکروتیوب ۵/۱ می ریزیم.
۲- سپس به مدت ۳ دقیقه در ۹۰۰۰ دور سانتریفیوژ می کنیم .
۳- محیط روئی را دور ریخته و باکتری در ته میکروتیوب رسوب می کند .
نکته:
برای استخراج غلظت بالاتری از پلاسمید می توان مراحل قبل را تکرار کرد.